Preparo de Lâminas Histológicas
Capítulo 2
– Da Fixação à Inclusão –
Para que se possa realizar o estudo histológico de órgãos, de tecidos e de células, faz-se necessário à confecção de lâminas com o material que se necessita analisar. Este material deve ser suficientemente fino e transparente para poder ser observados ao microscópio óptico com clareza e nitidez. Para isso, torna-se necessário um conjunto de etapas pelas quais os materiais de estudo precisam passar. A seguir mostra-se um quadro explicativo sobre o processo desde a fixação até a inclusão dos tecidos em parafina.
A tabela abaixo mostra as etapas que os fragmentos de órgãos removidos para estudo histológico (peças histológicas) passam até a inclusão em parafina. Segue-se o corte no micrótomo, a coloração e a montagem.
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ETAPAS
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FINALIDADE
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DURAÇÃO
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1.Fixação em fixador simples ou em mistura fixadora (líquido de Bouin, Helly, etc)
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Preservar a morfologia e a composição dos tecidos
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Cerca de 12h, dependendo do fixador e do tamanho da peça
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2.Desidratação em álcool etílico de concentrações crescentes, começando com álcool a 70% e terminando com álcool absoluto
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Remover a água dos tecidos
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6 a 24h, dependendo do tamanho da peça
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3.Clareamento ou diafanização em
benzol, xilol ou tuluol, solventes do álcool e da parafina |
Embeber a peça em substância miscível com a parafina
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1 a 6h, dependendo do tamanho da peça
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4.Impregnação pela parafina fundida, geralmente realizada em estufa a 600C
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Impregnar a parafina nas estruturas teciduais, para facilitar a obtenção dos cortes no micrótomo
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30 min a 6h, dependendo do tamanho da peça
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5.Inclusão: a peça é colocada num molde retangular contendo parafina fundida. |
Obtenção do bloco de parafina de forma regular e, para ser cortado no micrótomo
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